Kit Deteksi Genotip Human Papillomavirus (HPV) (Metode PCR Fluoresensi)

A. Tujuan Penggunaan

• Kit ini digunakan untuk deteksi kualitatif in vitro human papillomavirus (HPV) risiko tinggi dan risiko rendah.

• HPV risiko tinggi meliputi tipe 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82;  

• HPV risiko rendah meliputi tipe 6,11,40,42,43,44/55,54,57/71,61,70,72,81,84.

B.Prinsip

• Reagen ini adalah sistem pengujian qPCR Taqman® berbasis probe fluoresen multipleks.

• Primer dan probe khusus dirancang untuk mendeteksi berbagai jenis human papillomavirus (HPV).

• Pengendalian internal (IC) digunakan sebagai metode pemantauan untuk menghindari hasil tes negatif palsu.

• Enzim UDG/sistem dUTP ditambahkan untuk mendegradasi produk amplifikasi untuk menghindari hasil positif palsu.

• Kit ini adalah sistem lyophilized yang telah dicampur sepenuhnya. Enzim Taq, enzim UDG, buffer reaksi, primer dan probe spesifik telah ditempatkan sebelumnya dalam reagen.

C.Komponen

Komponen	8 sampel/perangkat	24 sampel/perangkat	Bahan
Reagen Lyophilized HP04	tabung strip 8x8	tabung strip 24×8	Primer & probe khusus untuk mendeteksi patogen target, Campuran dNTP/dUTP, Mg2+, Tac polimerase, dan enzim UDG
Penyangga Lisis HPV	1 mL×1 tabung	2,5 mL×1 tabung	Zat aktif permukaan, larutan garam seimbang
Kontrol Positif HPV	400 mL×1 tabung	400 mL×1 tabung	Plasmid berisi setiap urutan gen target
Kontrol Negatif HPV	400 mL×1 tabung	400 mL×1 tabung	Plasmid berisi urutan pengendalian internal
Larutan Pelarutan	1 mL×1 tabung	1 mL×3 tabung	Stabilisator

D. Penyimpanan dan Umur Simpan

Transportasi pada suhu kamar di bawah 37℃(＜1 bulan).

Disimpan pada -20℃±5℃ selama 1 tahun.

Pembekuan dan pencairan berulang tidak boleh melebihi 7 kali.

E.  Ikhtisar Proses Pengujian

F. Amplifikasi PCR

1. Masukkan tabung reaksi ke dalam instrumen PCR dan atur nama setiap reaksi sesuai urutannya.

2. Pilih empat saluran fluoresensi FAM,VIC/HEX,ROX dan CY5 untuk dideteksi. Target yang sesuai dari setiap saluran fluoresensi ditunjukkan pada tabel di bawah ini:

Lokasi	keluarga	VIC/HEX	ROX	CY5
Ya 1	HPV tipe 16	HPV tipe 18	HPV tipe 26	Pengendalian Internal (IC)
Ya 2	HPV tipe 31	HPV tipe 33	HPV tipe 35	HPV tipe 39
Ya 3	HPV tipe 45	HPV tipe 51	HPV tipe 52	HPV tipe 53
Ya 4	HPV tipe 56	HPV tipe 58	HPV tipe 59	HPV tipe 68
Ya 5	HPV tipe 66	HPV tipe 73	HPV tipe 82	HPV tipe 81
Ya 6	HPV tipe 6	HPV tipe 11	HPV tipe 40	HPV tipe 42
Ya 7	HPV tipe 43	HPV tipe 44/55	HPV tipe 54	HPV tipe 61
Ya 8	HPV tipe 57/71	HPV tipe 70	HPV tipe 72	HPV tipe 84

G.  Analisis dan Interpretasi Hasil

Silakan merujuk ke panduan pengguna.

H. Spesifikasi Kinerja

1. Batasan deteksi: 1000 Salinan/mL

2.Presisi: Koefisien variasi (CV,%) dari nilai Ct presisi dalam-batch/antar-batch adalah≤5%.

3.Akurasi: Tingkat kesesuaian referensi negatif/positif:100%.

4. Kekhususan: Organisme farget telah dianalisis secara silico untuk potensi reaktivitas silang dengan primer atau urutan probe.

Homologi dengan spesies lain semuanya di bawah 80%.

Analisis spesifisitas menunjukkan tidak ada reaksi silang dengan Trichomonas vaginalis, neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, gardnerella vaginalis, Haemophilus ducreyi, candida albicans, streptococcus agalactiae, ureaplasma urealyticum, ureaplasma parvum, mycoplasma hominis, mycoplasma genitalium, treponema pallidum, tipe virus herpes simplex 1 & 2.