Tampilan:0 Penulis:Editor Situs Publikasikan Waktu: 2022-05-25 Asal:Situs
Pembuatan larutan koloid emas untuk Tes antigen mengadopsi metode reduksi trisodium sitrat untuk menyiapkan larutan emas koloid.Ambil 1000 mL air ultra murni dan panaskan hingga mendidih dengan pengaduk magnet, tambahkan 40 mL larutan asam kloroaurat 1%, bila larutan mendidih kembali, segera tambahkan 36 mL larutan trinatrium sitrat 1%, lanjutkan mendidih hingga warnanya berubah. larutan berubah menjadi ungu 5 menit, matikan pemanas, dan kembalikan ke volume semula dengan air ultra murni setelah pendinginan.Diameter rata-rata dan potensi Zeta partikel emas koloid diukur dengan penganalisis ukuran nanopartikel dan disimpan pada suhu kamar dalam gelap.Lalu bagaimana informasi mengenai pembuatan larutan koloid emas untuk tes Antigen?Mari lihat.
Berikut daftar isinya:
l Persiapan Konjugat Berlabel Emas Koloid
l Persiapan strip tes Antigen cepat
l Batas deteksi minimum
l Uji stabilitas
Ambil 100 mL emas koloid uji Antigen ke dalam dua gelas kimia bersih, masing-masing, sesuai dengan kondisi pH yang ditandai optimal, tambahkan 3,3 mL dan 2,1 mL 0,1 mol/L kalium karbonat untuk mengatur pH, aduk dengan pengaduk magnet pada 300 r/ menit selama 10 menit, dan tambahkan antibodi monoklonal protein anti-N Tikus dan protein DNP-BSA masing-masing 1 mg dan diaduk selama 15 menit;Ditambahkan 2 mL larutan BSA 10%, dan ditambahkan 2 mL larutan BSA 10%, dan pengadukan dilanjutkan selama 20 menit;setelah diaduk, larutan koloid emas uji Antigen dipindahkan ke dua tabung centrifuge berukuran 50 mL, diatur parameter centrifuge adalah 9000 putaran/menit, 20 menit, dan 4 °C, dan dilakukan sentrifugasi.Setelah sentrifugasi, keluarkan tabung sentrifugasi dengan hati-hati, jangan dikocok, keluarkan supernatan dengan pipet, kumpulkan endapan, susun kembali dengan pengencer konjugasi hingga 10 mL, dan simpan pada suhu 4°C di tempat gelap.Diameter rata-rata dan potensi Zeta dari partikel konjugat emas koloid uji Antigen diukur dengan penganalisis ukuran nanopartikel.
Bantalan sampel dilapisi secara merata dengan larutan perlakuan bantalan sampel, dan jumlah pelapisan setiap serat kaca adalah 30 mL dan dikeringkan pada suhu 50°C selama 24 jam.Encerkan tes antigen cepat antibodi monoklonal protein anti-N tikus berlabel emas koloid dan konjugat protein DNP-BSA berlabel emas koloid dengan pengencer konjugat, rasio volume masing-masing adalah 18% dan 20%, dan diperlakukan dengan konjugat emas koloidal encer, bantalan coupler seragam dilapisi dengan cairan, jumlah pelapisan masing-masing serat kaca adalah 30mL, dan dikeringkan pada suhu 45°C selama 24 jam.Antibodi monoklonal protein anti-N tikus dan antibodi poliklonal anti-DNP kelinci diencerkan dengan PBS yang mengandung 0,01mol/L pH7,4 dan 5% trehalosa masing-masing hingga konsentrasi 2,0mg/mL dan 1,0mg/mL.Sebagai jalur deteksi (jalur T) dan jalur kendali mutu (Cline), antibodi penangkap dilapisi pada membran nitroselulosa (membran NC) dan dikeringkan pada suhu 45°C selama 48 jam.Film NC yang telah disiapkan, bantalan konjugasi, bantalan sampel, dan bantalan penyerap air ditempelkan pada pelat bawah PVC secara bergantian, dipotong menjadi 3mm/garis dengan slitter, dimasukkan ke dalam kotak kartu, dan dikemas dalam kantong aluminium foil.Selama pengujian, masukkan usap nasofaring ke dalam tabung pengangkat yang telah diisi sebelumnya dengan larutan ekstraksi (10mmol/LPBS, pH7.4, 1%NP-40), dan tambahkan 3 tetes (100μL) tetes demi tetes ke lubang sampel pengujian. kartu setelah ekstraksi selama 15 detik.Waktu reaksi 15 menit untuk interpretasi visual.Tes antigen Garis T dan Garis C sama-sama positif, Garis T tidak berwarna, Garis C negatif, Garis C tidak berwarna, menandakan strip tes efektif dan perlu diuji ulang.
Studi batas deteksi minimum dilakukan dengan kultur virus yang dimatikan dengan panas.Eluat usap nasofaring orang sehat digunakan sebagai matriks negatif uji Antigen.Pertama, pengenceran gradien 10 kali lipat dilakukan.Setelah hasil tes cepat Antigen negatif, konsentrasi sebelumnya kemudian dilakukan pengenceran gradien 2 kali lipat, dan tidak kurang dari 19 kali dari 20 tes positif.Tingkat konsentrasi (≥95%) digunakan sebagai batas deteksi minimum reagen.
Tempatkan kartu reagen uji Antigen yang telah disiapkan ke dalam oven bersuhu 50°C, dan uji dengan bahan kendali mutu konsentrasi tinggi dan rendah setiap dua minggu.Ulangi pengujian sebanyak 3 kali untuk setiap sampel.Perbedaan kedalaman pita antara pereaksi pemusnah dipercepat suhu tinggi dan pereaksi kontrol selama 1 minggu dan 8 minggu.
Di atas adalah informasi yang relevan tentang pembuatan larutan koloid emas untuk uji Antigen.Jika Anda tertarik dengan Tes Antigen cepat COVID-19, Tes Rapid Antigen SARS-CoV-2, Anda dapat menghubungi kami.Situs web kami adalah www.bioteke.cn.
